在过去几年,ChIP技术在不断发展和改进,包括抗体、磁珠和缓冲液,这也使得ChIP的应用日益广泛。当然,这项技术还有改进的空间。Porvair Science公司就推出一种Chromatrap新技术,让研究人员能够更快、更轻松、更高效地开展ChIP分析。

在免疫沉淀这一步,以往多采用磁珠来沉淀DNA-蛋白质-抗体复合物。而Chromatrap分析采用与蛋白A或蛋白G结合的固相多孔聚合物圆盘(disc)来捕获染色质。这些圆盘装在离心柱中,像海绵一样吸收染色质复合物。DNA片段经过三次洗涤,之后洗脱,得到最终的纯化产物。DNA片段在分离之后,可通过PCR、qPCR、芯片、测序或其他技术来鉴定。

与磁珠法相比,离心柱的使用显然要简单得多,而且,DNA pull down水平高了25倍。据介绍,BioVyon™ 蛋白A圆盘有着专利的多孔结构,可最大限度提高染色质捕获的效率。化学反应都在圆盘内发生,无需悬浮或重悬,也不用担心磁珠丢失。此外,每次分析最少只需要7500个细胞,让珍贵样品也能投入分析。

Porvair Science提供标准试剂盒和高级试剂盒,区别在于后者包含了阳性抗体对照、阴性抗体对照以及PCR引物。此外,它还提供96孔微孔板,实现高通量的ChIP分析。在这些试剂盒都有超声或酶切的版本,供您选择。

许多客户在使用了Chromatrap产品之后,发表了积极的看法。莱斯大学生化与细胞生物学研究人员Brian J. Engel评论道:“与传统的磁珠法分析相比,我最喜欢Chromatrap试剂盒的方面在于其易用性、速度和可靠性。无需担心在洗涤过程中会丢失磁珠,降低染色质产量。”他的同事Curt Warren补充道:“此试剂盒能节省试剂和时间,并开展更彻底、更高效的IP实验。有了Chromatrap的重复性,我们不会再回到磁珠法ChIP了,我们的研究团队已经充分肯定了这种分析。”

英国斯望西大学的Steve Conlan教授认为,Chromatrap简化了复杂的实验流程,让分析更快速、更用户友好。“利用此试剂盒,我们能获得更一致的数据,更重要的是,我们可使用较少的起始样品。我们所有的细胞系和原代细胞分析都已彻底转换到Chromatrap分析。”

Porvair Science的销售总监Stephen Knight谈道:“不断扩展的应用方案和Chromatrap® 96高通量ChIP平台的引入,使得在过去12个月内使用Chromatrap技术的研究团队翻了一番。我们非常高兴,早期试用者的反馈都非常积极。”(生物通 余亮)

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