研究背景
创伤性脑损伤(TBI)是全球范围内致残率最高的神经系统疾病之一，尤其重复性轻度TBI(如运动 concussion 或军事爆炸伤)与阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)等神经退行性疾病(ND)的风险显著相关。尽管单次TBI的病理机制已有较多研究，但重复性损伤如何通过累积效应加剧神经退行性进程仍不明确。现有治疗手段仅能缓解症状，缺乏针对长期认知衰退的干预策略，这主要源于对损伤后时空动态分子网络的认知不足。

研究设计与技术方法
法国里尔大学、美国贝鲁特大学等机构的研究团队通过建立C57BL/6小鼠单次/三次闭合性轻度TBI模型，结合多组学技术系统解析了损伤机制：1) 采用Leica立体定位撞击仪构建smTBI(1次)和rmTBI(3次间隔24h)模型，采集48小时(急性期)和1周(亚急性期)的皮层与海马组织；2) 基于LC-MS/MS的shotgun蛋白质组学鉴定3,637种蛋白质，通过MaxQuant和Proteome Discoverer 2.5进行差异蛋白分析；3) 整合WGCNA构建共表达网络，机器学习(Ridge模型准确率96%)筛选关键生物标志物；4) 行为学测试评估运动(爬杆试验、握力测试)和认知功能(Morris水迷宫)。

研究结果

差异表达蛋白的时空特征
蛋白质组分析显示rmTBI导致更广泛的蛋白失调(2,238 DEPs vs smTBI的467 DEPs)。海马区在重复损伤中呈现独特的"双相反应"：急性期(48h)上调血小板激活相关蛋白(Fga、Hp)，而亚急性期(1周)突触蛋白(Snca、Gria4)持续下调。皮层区域则表现为线粒体呼吸链复合物(Cox6a1、Ndufs6)和染色质重塑蛋白(Hdac11)的显著异常。

WGCNA揭示损伤特异性模块
共表达网络鉴定出9个功能模块，其中棕色模块(405蛋白)与rmTBI强相关(r=0.67)，富集于线粒体能量代谢(Atp6v1a、Slc25a4)；紫色模块(443蛋白)则显示神经突触相关蛋白(Shank1、Kif5a)的协同下调。PPI分析发现枢纽蛋白Cox6a1与Snca同时参与线粒体功能和突触调控，提示二者可能是神经退行性变的交叉节点。

行为学验证
rmTBI组在急性期表现出显著运动协调障碍(爬杆时间延长210%，p<0.001)，至30天恢复；而认知缺陷持续存在：水迷宫测试中目标象限停留时间减少37%(p<0.01)，提示海马依赖性记忆损伤与蛋白质组发现的突触失调一致。

结论与意义
该研究首次系统描绘了重复性TBI的时空蛋白质组图谱，揭示三大核心机制：1) 线粒体功能障碍(Cox6a1等复合物失调)加剧氧化应激；2) 突触可塑性蛋白(Snca、Nrgn)持续损伤导致认知衰退；3) 表观调控因子(Hdac11)通过染色质重塑影响神经修复。这些发现为开发针对重复性脑损伤的精准干预策略提供了分子基础，如靶向ApoA1脂代谢通路或HDAC抑制剂可能缓解神经退行性进程。论文发表于《Signal Transduction and Targeted Therapy》，为TBI-ND关联研究建立了多组学整合分析范式。