转录特征独特的ChAT⁺ B细胞在肝再生过程中升高且必需

研究团队利用ChAT-GFP报告小鼠模型，发现部分肝切除（PHX）后4小时，肝脏中表达胆碱乙酰转移酶（ChAT）的B细胞数量显著增加。单细胞测序显示这些ChAT⁺ B细胞具有独特的转录特征，高表达乙酰胆碱合成酶Slc18a3。通过构建B细胞特异性ChAT敲除小鼠（ChAT^flox;Mb1-Cre），研究者证实缺失ChAT⁺ B细胞会导致PHX后小鼠死亡率显著升高，而回输野生型B细胞可挽救这一表型。

肝细胞增殖在缺乏ChAT⁺ B细胞时受损

ChAT^flox;Mb1-Cre小鼠在PHX后24小时表现出严重的肝再生障碍：肝重/体重比降低，血清ALT/AST水平升高，肝组织坏死区域增加。单细胞转录组分析发现，二倍体肝细胞中促增殖基因（如Il6ra、Stat3等）表达显著下调，而抗增殖基因表达上调。免疫组化显示Cyclin D1蛋白表达明显减少，证实肝细胞增殖受阻。

库普弗细胞和肝内CD8⁺ T细胞表型改变

单细胞轨迹分析揭示，缺乏ChAT⁺ B细胞时，库普弗细胞倾向于分化为免疫抑制性表型，高表达Il10、Hmox1等基因，同时IL-6分泌减少。另一方面，肝内CD8⁺ T细胞IFNγ产生显著增加。通过抗体清除实验证明，CD8⁺ T细胞（而非NK1.1⁺细胞）是病理性IFNγ的主要来源。

α7 nAChR敲除小鼠肝再生受损

空间转录组分析发现，PHX后8小时，Chat⁺ B细胞与表达α7 nAChR（Chrna7）的库普弗细胞、CD8⁺ T细胞存在共定位。α7 nAChR敲除小鼠表现出与ChAT⁺ B细胞缺失相似的表型：IL-6分泌减少、IFNγ产生增加、肝再生障碍。体外实验证实，ACh通过α7 nAChR直接抑制CD8⁺ T细胞的AKT/ERK磷酸化，从而减少IFNγ产生；同时促进RAW264.7巨噬细胞的STAT3磷酸化和IL-6分泌。

ACh通过α7 nAChR双向调控肝再生机制

研究最终阐明了一个精妙的双向调控机制：ChAT⁺ B细胞产生的ACh一方面通过α7 nAChR激活库普弗细胞，促进其分泌肝细胞增殖必需的IL-6；另一方面通过同一受体抑制CD8⁺ T细胞活化，减少对肝细胞有害的IFNγ产生。这一发现不仅解决了"肝脏缺乏副交感神经支配却需要胆碱能信号"的长期谜题，更为临床促进肝再生提供了新策略——靶向B细胞-α7 nAChR轴可能成为治疗肝损伤的新方向。